RESUMO
Anaplasma platys infects peripheral blood platelets and causes infectious cyclic thrombocytopenia in canines. The genes, proteins, and antigens of A. platys are largely unknown, and an antigen for serodiagnosis of A. platys has not yet been identified. In this study, we cloned the A. platys major outer membrane protein cluster, including the P44/Msp2 expression locus (p44ES/msp2ES) and outer membrane protein (OMP), using DNA isolated from the blood of four naturally infected dogs from Venezuela and Taiwan, Republic of China. A. platys p44ES is located within a 4-kb genomic region downstream from a putative transcriptional regulator, tr1, and a homolog of the Anaplasma phagocytophilum, identified here as A. platys omp-1X. The predicted molecular masses of the four mature A. platys P44ES proteins ranged from 43.3 to 43.5 kDa. Comparative analyses of the deduced amino acid sequences of Tr1, OMP-1X, and P44/Msp2 proteins from A. platys with those from A. phagocytophilum showed sequence identities of 86.4% for Tr1, 45.9% to 46.3% for OMP-1X, and 55.0% to 56.9% for P44/Msp2. Comparison between A. platys and Anaplasma marginale proteins showed sequence identities of 73.1% for Tr1/Tr, 39.8% for OMP-1X/OMP1, and 41.5% to 42.1% for P44/Msp2. A synthetic OMP-1X peptide was shown to react with A. platys-positive sera but not with A. platys-negative sera or A. phagocytophilum-positive sera. Together, determination of the genomic locus of A. platys outer membrane proteins not only contributes to the fundamental understanding of this enigmatic pathogen but also helps in developing A. platys-specific PCR and serodiagnosis.
Assuntos
Anaplasma/metabolismo , Anaplasmose/microbiologia , Proteínas da Membrana Bacteriana Externa/metabolismo , Sequência de Aminoácidos , Substituição de Aminoácidos , Animais , Anticorpos Antibacterianos/imunologia , Antígenos de Bactérias/imunologia , Antígenos de Bactérias/metabolismo , Proteínas da Membrana Bacteriana Externa/química , Proteínas da Membrana Bacteriana Externa/genética , Clonagem Molecular , Doenças do Cão/microbiologia , Cães , Regulação Bacteriana da Expressão Gênica/fisiologia , Dados de Sequência Molecular , Filogenia , Especificidade da EspécieRESUMO
Amostras de sangue coletadas de cães clinicamente sadios pertencentes ao exército da Venezuela e de seus treinadores foram analisadas pela técnica de PCR 16S rRNA específica para Anaplasma platys, A. phagocytophilum ou Ehrlichia ewingii. Dezesseis por cento (7/43) dos cães foram positivos, enquanto que todas as amostras de origem humana [25] foram negativas para A. platys. Todas as amostras, tanto de humanos quanto de caninos, foram negativas para E. ewingii ou A. phagocytophilum. Doze carrapatos da espécie Rhipicephalus sanguineus, coletados dos cães, foram negativos para A. platys pelo teste de PCR de transcricão reversa. As seqüênciasquase inteiras do gene 16S rRNA (1.364 pb) e do operon groESL (1.646 pb) de A. platys isolado de um cão foram determinadas, revelando que ambas as seqüências estão estreitamente relacionadas às seqüências de A. platys detectadas em carrapatos R. sanguineus na República Democrática do Congo.
